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文獻標題：The core cellular network modulates immune phenotype switching in hepatitis B
發表期刊：Science Bulletin（IF 21.1）
DOI：https:/ /doi.org/10.1016/j.scib.2025.03.038
核心試劑：五色多重熒光免疫組化試劑盒（abs50013）、檸檬酸鈉-EDTA抗原修復液（abs9249）
乙肝病毒感染的臨床異質性ji強，不同階段（免疫耐受期 IT、免疫活動期 IA、非活動期 ICI 及急性乙肝 AHB）的免疫狀態差異顯著，但其核心調控機制尚未wan全闡明。本研究團隊以 “臨床樣本分層 - 多組學技術整合 - 功能驗證" 為核心思路，構建了全面的研究體系：
樣本體系：收集 18 例乙肝患者肝活檢樣本、15 例配對外周血樣本（覆蓋 IT/IA/ICI/AHB 四階段），以及健康對照樣本，嚴格排除干擾因素確保樣本純度；
技術矩陣：整合單細胞 RNA-seq、空間轉錄組、多重免疫組化、TCR/BCR 測序、體外 PBMC 刺激等技術，實現 “細胞亞群 - 基因表達 - 空間定位 - 功能驗證" 的全鏈條解析；
核心目標：揭示乙肝不同階段肝內及外周免疫細胞的表型特征、細胞間互作網絡，明確調控免疫表型轉換的核心通路與分子機制。
關鍵技術流程示意圖：
研究首ci明確肝內 CD8+T 細胞分為兩大核心亞群：
GZMK+ CD8+T 細胞：在 AHB 和 IA 階段占比更高，具有肝駐留性和耗竭表型（高表達 CXCR6、PDCD1），通過 FasL/Fas 或 IFN-γ 介導細胞毒性；
GZMB+ CD8+T 細胞：在 IT 階段富集，依賴穿孔素發揮細胞毒性，且與臨床炎癥指標呈負相關。
通過偽時間軌跡分析，進一步發現乙肝特異性 CTL（hpCTL）存在三種細胞狀態，IA 階段以 FASLG+ State3 為主，IT 階段以 GZMB+PRF1+ State1 為主，為不同階段免疫干預提供了靶點（對應原文圖 S3a、S8）。
肝細胞：門脈周圍肝細胞（Hep2）在 IT 階段 HBV 感染率更高，MHC-I 基因高表達但共刺激分子（CD40、CD80）低表達，介導 CD8+T 細胞功能障礙；
巨噬細胞：MRC1+CDH5 + 枯否細胞高表達抗原提呈相關分子（HLA、TAP1）及共刺激分子，在 AHB/IA 階段增強 IL-2 信號，可挽救 CD8+T 細胞功能；
調控通路：IA 階段 PGE2-EP4 信號通路激活（血漿 PGE2 水平與 ALT 正相關），抑制 CD8+T 細胞細胞毒性；IL-33 + 肝竇內皮細胞、DC-SIGN + 巨噬細胞介導的 2 型免疫抑制在 IA 階段顯著增強（對應原文圖 S5、S6）。
CD8 + 耗竭 T 細胞、Treg、CXCL13+ Tfh 細胞與血漿 ALT 水平、肝組織炎癥分級呈正相關，而 GZMB+ CD8+T 細胞呈負相關，為乙肝臨床預后評估提供了潛在生物標志物（對應原文圖 S11）。
本研究中，多重免疫組化技術作為解析肝內細胞定位與表型的關鍵手段，離不開 Absin 兩大核心產品的穩定支持：
| 產品名稱 | 產品貨號 | 應用場景 |
|---|---|---|
| TSA 5-color kit | abs50013 | 多重免疫組化熒光染色 |
| Citrate-EDTA Antigen Retrieval Solution | abs9249 | 甲醛固定石蠟切片（FFPE）抗原修復 |
應用環節：肝組織 FFPE 切片多重免疫組化前處理；
核心作用：甲醛固定會導致抗原表位交聯遮蔽，abs9249 通過檸檬酸鹽 - EDTA 緩沖體系，在微波加熱條件下高效修復抗原表位（原文步驟：“transferred to preheated Citrate-EDTA Antigen Retrieval Solution (abs9249, Absin) before being heat-treated using a microwave for 15 minutes"），確保后續一抗能夠特異性結合靶標分子；
實驗價值：為 CD8、GZMK、GZMB 等關鍵標志物的高效檢測奠定基礎，是免疫染色信號清晰的前提。
應用環節：肝組織中 CD8+T 細胞亞群及功能分子的多重標記；
核心作用：采用酪酰胺信號放大（TSA）技術，可在同一張切片上同時檢測 5 種靶標（CD8、GZMK、GZMB、Transferrin、DAPI），通過不同熒光通道區分，實現細胞亞群定位與功能表型的同步分析（原文步驟：“paired with TSA 5-color kit (abs50013-20T, Absin). Finally, they were stained with DAPI"）；
實驗價值：清晰呈現 GZMK+ CD8+T 細胞、GZMB+ CD8+T 細胞在肝組織中的空間分布，以及與肝細胞、巨噬細胞的共定位關系，為 “細胞互作調控免疫表型" 的結論提供直接可視化證據（對應原文圖 S2c：CD8+T 細胞亞群染色結果；圖 S4i：肝組織中關鍵分子表達定位）。
| 原文圖片 | 圖片內容 | Absin 產品貢獻 |
|---|---|---|
| 圖 S2c | 乙肝患者肝組織中 CD8+T 細胞亞群（GZMB+、GZMK+）熒光染色結果 | abs9249 保障抗原暴露，abs50013-20T 實現多標志物同步顯色，清晰區分不同功能 CD8+T 細胞 |
| 圖 S4i | 肝組織中 AREG、EGFR 等分子的空間表達定位 | TSA 試劑盒的高靈敏度熒光信號放大，確保低表達靶標的有效檢測 |
| 圖 S1b/d | 肝內細胞亞群聚類及不同階段占比分析 | 多重免疫組化結果為單細胞測序的細胞類型注釋提供驗證依據 |
本研究通過多維度技術解析乙肝免疫調控機制，其成果的發表離不開精準高效的實驗工具支持。Absin 的 TSA 多重染色試劑盒與抗原修復液，憑借穩定的性能、高效的效果，成功助力研究團隊完成肝組織多標志物的精準檢測，為核心結論的驗證提供了關鍵技術支撐。
在免疫表型分析、腫瘤微環境解析、傳染病免疫機制等研究領域，Absin 始終以 “提供高品質科研工具" 為核心，持續優化免疫組化、流式檢測、分子生物學等系列產品，助力科研人員突破實驗瓶頸，加速科研成果轉化。
未來，Absin 將繼續深耕生命科學研究需求，推出更多適配前沿技術的創新產品，與全球科研工作者攜手，探索生命奧秘，推動醫學進步！
| 貨號 | 名稱 | 規格 |
|---|---|---|
| abs50013 | 五色多重熒光免疫組化染色試劑盒 | 20T/50T/100T |
| abs9249 | 檸檬酸鈉-EDTA抗原修復液 | 100mL |
| 貨號 | 商品名 | 規格 |
|---|---|---|
| abs50086 | 雙色多重熒光免疫組化染色試劑盒（抗兔二抗） | 100T |
| abs50087 | 雙色多重熒光免疫組化染色試劑盒（鼠兔通用二抗） | 100T |
| abs50088 | 三色多重熒光免疫組化染色試劑盒（抗兔二抗） | 100T |
| abs50089 | 三色多重熒光免疫組化染色試劑盒（鼠兔通用二抗） | 100T |
| abs50012 | 四色多重熒光免疫組化染色試劑盒（鼠兔通用二抗） | 20T/50T/100T |
| abs50168 | 四色多重熒光免疫組化染色試劑盒B（抗兔二抗） | 20T/50T/100T |
| abs50013 | 五色多重熒光免疫組化染色試劑盒（鼠兔通用二抗） | 20T/50T/100T |
| abs50029 | 五色多重熒光免疫組化染色試劑盒（抗兔二抗） | 20T/50T/100T |
| abs50014 | 六色多重熒光免疫組化染色試劑盒（鼠兔通用二抗） | 20T/50T/100T |
| abs50030 | 六色多重熒光免疫組化染色試劑盒（抗兔二抗） | 20T/50T/100T |
| abs50048 | 六色多重熒光免疫組化染色試劑盒（plus）（抗兔二抗） | 20T/50T/100T |
| abs50049 | 六色多重熒光免疫組化染色試劑盒（plus）（鼠兔通用二抗） | 20T/50T/100T |
| abs50015 | 七色多重熒光免疫組化染色試劑盒（鼠兔通用二抗） | 20T/50T/100T |
| abs50031 | 七色多重熒光免疫組化染色試劑盒（抗兔二抗） | 20T/50T/100T |
| abs50037 | 七色多重熒光免疫組化染色試劑盒（plus）（鼠兔通用二抗） | 20T/50T/100T |
| abs50038 | 七色多重熒光免疫組化染色試劑盒（plus）（抗兔二抗） | 20T/50T/100T |
| abs50165 | 七色多重熒光免疫組化染色試劑盒（770染料增強版）（抗兔二抗） | 20T/50T/100T |
| abs50166 | 七色多重熒光免疫組化染色試劑盒（770染料增強版）（抗鼠兔通用二抗） | 20T/50T/100T |
| abs50018 | 十色多重熒光免疫組化染色試劑盒 | 100T |
| abs50083 | 肺癌腫瘤微環境多重熒光免疫組化檢測試劑盒（I） | 20T |
| abs50084 | 肺癌腫瘤微環境多重熒光免疫組化檢測試劑盒（II） | 20T |
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