一、概念:細胞凋亡:由基因控制的細胞自主的有序的死亡,是高度調控的過程,故又稱為細胞的程序性死亡。二、特征:細胞壞死是病理狀態下由損傷因子誘導產生的自溶現象,表現為:細胞皺縮變小、質膜起泡、染色體凝縮、細胞核碎裂、DNA片段化以及吞噬體最終吞噬細胞。圖1細胞凋亡與細胞壞死過程三、檢測試劑盒1、AnnexinV/PI檢測試劑盒根據細胞凋亡過程中的變化,可以通過多種途徑對其進行檢測,目前市面上常用的試劑盒包括一下幾種:AnnexinV-FITC/PI細胞凋亡檢測試劑盒(abs50...
細胞凍存是細胞培養的重要環節之一。利用凍存技術將細胞置于-196℃液氮中低溫保存,可以使細胞暫時脫離生長狀態而將其細胞特性保存起來,這樣在需要的時候再復蘇細胞用于實驗。而且適度地保存一定量的細胞,可以防止因正在培養的細胞被污染或其他意外事件而使細胞丟種,起到了細胞保種的作用。細胞凍存技術要點是慢凍,標準的凍存程序為降溫速率-1~-2℃/min;當溫度達-25℃以下時,可增至-5℃~-10℃/min。我們常用的傳統方法是將凍存管置于4℃30分鐘----20℃60分鐘----80...
什么是過氧化物酶鏈霉親和素(PeroxidaseStreptavidin,SA-HRP)?鏈霉親和素(Streptavidin,簡稱SA)是從細菌阿維丁鏈霉菌中純化出的一種60kDa的蛋白質。鏈霉親和素同源四聚體對生物素(即維生素B7)具有很高的親和力。而過氧化物酶鏈霉親和素就是將過氧化物酶(HorseradishPeroxidase,縮寫為HRP)偶聯在鏈霉親和素上形成,可與Biotin標記的各種親和純化抗體或者Biotin標記的色譜級蛋白聯用進行各種免疫檢測。SA-HRP...
Q1:轉移性的癌類器官,是用轉移部位的癌類器官培養基還是原發部位的癌類器官培養基比較好?答:我們查閱大量文獻,構建原發腫瘤和轉移癌的類器官都是用的適合原發腫瘤的類器官培養基,比如腸癌的原發灶和轉移灶,乳腺癌的原發灶與轉移灶,所以用原發部位的癌類器官培養基比較好。Q2:轉移性的類器官形態和轉移部位的癌類器官長得像還是和原發部位的癌類器官長得像?答:轉移性的類器官形態和原發性的比較像。Q3:做胰腺癌類器官藥篩,對于加藥時,類器官的大小有推薦嗎?或者說鋪板幾天后加藥比較好呢?答:類...
一、類器官收集及洗滌1、類器官收集移液器吸去培養基,每孔添加1-2mL左右4℃類器官傳代培養緩沖液(abs9730),輕柔吹打基質膠,收集在15mL離心管中(24孔板,每5孔為一組),加類器官傳代緩沖液定容至10mL(緩沖液越多,基質膠被稀釋的越充分,越容易去除),4℃靜置10min或-20℃放置5min(目的是使基質膠軟化,如果冰箱保溫效果強,冷凍3min),300g4℃,離心5min棄上清。2、類器官清洗添加1mL類器官傳代培養緩沖液重懸,300g4℃,離心5min棄上清...
小分子化合物是指分子量小于1000Da(尤其小于500Da),具有生物學活性的化合物。其與細胞因子和蛋白不同,小分子化合物可以透過細胞膜進入細胞,發揮相應的生物學功能。小分子化合物的作用靶點眾多,已廣泛應用于腫瘤學、免疫學、神經生物學、表觀遺傳學、干細胞、類器官、細胞凋亡、離子通道和信號轉導等生命科學諸多重要的研究領域。小分子化合物主要通過調節其蛋白靶點的活性發揮作用。目前小分子化合物的蛋白靶點主要包括酶、離子通道和受體三大類。表1小分子化合物的分類及作用機制分類作用機制酶的...
微生物污染是一直是細胞培養的一個主要問題,大到諸如細胞間、層流室這種實驗室的設計布局,小到每一次試劑外包裝的消毒,都是在為了細胞免受外源微生物的侵害。應各位老師們的要求,今天這篇文章主要講解細胞房的除菌方案,順便討論一下常見的無菌操作漏洞。當您和同門的細胞頻繁出現污染,更換試劑之后仍然不能改善,細胞丟棄一波又一波,建議為細胞間來場消毒吧。無論是紫外線照射(物理方法)還是甲醛加高錳酸鉀熏蒸,都是為了盡可能的殺滅空氣中的微生物。圖1細胞室一、紫外線照射法紫外線按照波長劃分為四個波...
環狀(circRNA)是一類特殊的共價閉環RNA分子,在調控生理和病理進程中,通過不同的機理發揮著重要作用。傳統上,circRNA被認為是一種非編碼RNA(ncRNA)。2014年,在北卡羅來納大學報導了環形RNA在細胞內可通過非帽依賴的機理來翻譯蛋白,人們認識到circRNA也具有編碼與表達蛋白的能力。此后,隨著體外環化技術的發展,比線性mRNA穩定性更強的合成circRNA成為mRNA治療領域備受關注的新技術,有望以mRNA藥物相似的遞送方法,實現疾病的治療。圖1環狀RN...
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