一、什么是TCR-T細胞療法?目前,腫瘤免疫治療方興未艾,群雄并起,其中有效的治療策略之一就是過繼細胞轉移療法(ACT)。嵌合抗原受體(CAR)和工程化T細胞受體(TCR)是近年來主要的過繼性T細胞免疫療法。TCR(Tcellreceptor)是T細胞表面的特異性受體,其α鏈和β鏈由高質量、高親和力的抗原特異性T細胞克隆產生,以非共價鍵與CD3結合,形成TCR-CD3復合物,通過識別并結合MHC呈遞的抗原從而激活T細胞,促進T細胞的分裂與分化;其作用機制是向普通T細胞中引入新...
“你好,我的樣本是養的細胞,我還能做多色組化嗎?”答案是可以!對于多重熒光免疫組化(mIHC)來說,幾乎不挑剔樣本類型,但需要攻克一個難題——多輪洗脫。傳統的組織樣本經過前期處理固定包埋,再加上防脫載玻片的助力,在洗脫過程中,脫片概率相對小,即使有小部分脫落,但影響不至于很大;而細胞樣本,有可能在一張片子上,本身細胞數量就不多,如果還有脫落,可能最后“顆粒無收”。今天Absin分享的是細胞樣本做多色的方法,其中不能缺少的依舊是我們的“老演員”——抗體洗脫液(abs994)。一...
近年來,腫瘤免疫療法在癌癥治療中非常火熱。腫瘤免疫學治療的目的是激發或調動機體的免疫系統,增強腫瘤微環境抗腫瘤免疫力,從而控制和殺傷腫瘤細胞。隨著免疫治療的興起也推動了腫瘤研究的發展,但是由于人源化體系的復雜性、免疫系統的部分或無效重組建等問題,致使免疫腫瘤模型面臨著巨大的挑戰,臨床上迫切需要能夠用于個體化驗證療效的體外模型。類器官的出現給腫瘤免疫治療提供了新的契機,然而,現有的類器官中缺乏免疫細胞限制了其發展。小愛這次給大家介紹一下基本的腫瘤類器官免疫共培養方法,如下:1、...
胰腺癌對化療或免疫治療的應答率較低。雖然微創不可逆電穿孔(IRE)消融術是治療不可切除胰腺癌的一種選擇,但是這種腫瘤類型的免疫抑制腫瘤微環境容易導致腫瘤復發。因此,加強內源性適應性抗腫瘤免疫是提高消融治療和消融后免疫治療效果的關鍵。近日,上海交通大學王忠敏教授和崔文國教授在Naturecommunications(IF=16.6)上發表了題為“Interventionalhydrogelmicrospherevaccineasanimmuneampli?erforactiva...
間充質干細胞(mesenchymalstemcells,MSCs)是來源于中胚層的多能成體干細胞,廣泛存在于臍帶、骨髓、脂肪、牙髓、月經血等組織,體外培養可分化為成骨細胞、軟骨細胞、脂肪細胞等多種類型的細胞。圖1TheMesengenicProcess(圖片來源于文獻,僅供學習參考用)MSCs具有自我更新能力和多向分化潛能,能夠釋放出許多具有抗凋亡、免疫調節、促血管生成等功能的生物活性因子,可刺激組織器官再生,并且低水平表達主要組織相容性復合體(MHC)Ⅰ類分子,不表達MHC...
染色質免疫共沉淀技術的原理是在活細胞狀態下固定蛋白質-DNA復合物,并將其隨機切斷為一定長度范圍內的染色質小片段,然后通過免疫學方法沉淀此復合體,特異性地富集目的蛋白結合的DNA片段,通過對目的片斷的純化與檢測,從而獲得蛋白質與DNA相互作用的信息。一、細胞交聯與裂解在裝有20ml生長培養基的150mm培養皿中培養貼壁細胞,長到80%-90%密度,約107個細胞。如有必要,可進行刺激或處理。建議采用1×106個細胞作為一次ChIP的細胞量。1)在20ml培養基中加入終濃度為1...
一、前言:多重熒光免疫組化(mIHC)主要的技術原理來自TSA技術,TSA即酪酰胺信號放大,是一類利用辣根過氧化酶(HRP)對靶蛋白或核酸進行高密度原位標記的酶學檢測方法。用這種方法做多重熒光染色是利用二抗上帶有的HRP(而不是直接偶聯熒光素),來催化后續添加入體系的非活性熒光素,該熒光素在HRP和過氧化氫的作用下被活化,跟臨近蛋白的酪氨酸殘基共價偶聯,使得蛋白樣品與熒光素穩定結合。然后進行微波處理,前一輪非共價結合的抗體被洗掉,共價結合的熒光素還留存在樣品上。再換個一抗來第...
膜蛋白是結合或整合在細胞膜或細胞器上的一類蛋白,在各種重要的生理活動中發揮著重要作用。人類基因組約三分之一的基因都用于編碼膜蛋白[1-2]。作為生物膜功能的主要承擔者,膜蛋白負責細胞內外和細胞間的物質運輸、能量傳遞和信息傳導等。其功能紊亂常常與人類重大疾病相關,因此膜蛋白是一類非常重要的藥物靶點。圖1細胞膜結構示意圖去垢劑也稱為表面活性劑,是一類同時具有親水頭部和疏水尾部的分子,能夠使脂膜解體釋放膜蛋白并維持去膜狀態下膜蛋白結構和功能的穩定性。去垢劑的雙極性和理化特性如臨界膠...
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