血清的熱滅活是很多培養者感興趣的話題,價格不菲的血清中含有諸如生長因子,維生素,氨基酸等珍貴物質,而將它們置于50℃以上的溫度長達30分鐘是*沒有必要的。盡管如此,在大多數實驗室之中血清的熱滅活還是作為常規來執行,多數實驗者并沒有考慮熱處理對血清中的生長因子、氨基酸等成分帶來的負面影響,下面我們就對胎牛血清的熱滅活進行一些探討和解釋。清熱滅活操作步驟:①選用與血清瓶同規格的對照瓶一個。②對照瓶內放入與血清等體積的水。③溫度預試。對照瓶內插入2—3支經挑選的溫度計(保證測試溫度...
近日,nature刊登了一篇文章闡述了中性粒細胞胞外陷阱DNA通過CCDC25促進腫瘤轉移的機制,小編看到后也是跟大家來分享下:摘自nature中性粒細胞胞外陷阱(NETs)是由染色質DNA絲狀物和顆粒蛋白包裹而成,由中性粒細胞釋放,以捕捉微生物體。近的研究表明,在小鼠模型中,NETs的DNA成分(NET-DNA)與腫瘤轉移有關。然而,NET-DNA在腫瘤轉移中的作用和臨床意義尚不清楚。文章結果表明,NETs在乳腺癌和結腸癌肝轉移中含量豐富,血清NETs可預測早期乳腺癌肝轉移...
細胞極性建立、極化的細胞遷移、胞內囊泡運輸以及有絲分裂中的染色體分離都需要微管。微管(MTs)是α/β-微管蛋白異二聚體的非平衡聚合物,其中組裝后即在β-微管蛋白處發生GTP水解。絕大多數微管從組織中心成核。普遍的微管行為就是動態不穩定性,這個過程表現為正端緩慢生長,伴隨快速的解聚作用(“災難”)并隨之復蘇。雖然微管的負端表現出動態不穩定性,盡管速率低于正端,負端通常有限制并固定在MT組織中心,因此通常不會參與微觀動力過程。在動態不穩定和穩定的微管間維持平衡,大部分通過結合微...
蛋白免疫印跡實驗(WesternBlot)實驗大家肯定都不陌生,要想做出好看的條帶,從制膠開始就不容半點馬虎。WB制膠可謂實驗室新手的必修課了,想想小編我在當初實驗室的時候,就沒少幫師兄師姐配置WB凝膠,泛黃的配方表小編還記憶猶新。WB凝膠配方表說起WB凝膠配置,小編可有一肚子苦水要倒,讓人頭疼的一點就是多種溶液都需要計算量取,每次調移液器就要調半天。還有各種試劑的保存條件也不一樣,配膠之前還需要從冰箱,室溫柜子里分別拿出不同的溶液。這還不算,容易出問題的促凝劑APS,需要新...
做多了IHC實驗的小伙伴,相信對于抗原修復都不陌生,這看似簡單的一小步,往往會對IHC實驗產生顯著影響。愛必信作為您身邊的科研百寶箱,秉持著嚴謹認真的態度,為您總結了一系列從修復緩沖液、煮沸裝置到修復方法,注意事項的小技巧,希望這些小細節能完善您的實驗,像愛必信一直堅信的一樣,從小處入手,時刻陪伴您的科研生活,助力實驗大成功。抗原修復是針對石蠟包埋的切片的必要步驟,大多數甲醛固定的組織在開始染色前都要先修復抗原,這是由于在固定過程中產生了亞甲基橋使蛋白之間交聯屏蔽了抗原位點。...
蛋白質印跡(WesternBlot),相信大家對此都不陌生,做為檢測蛋白表達及半定量的基礎實驗方法,也是很多小伙伴們初入實驗室的入門課。“上手容易,精通難”可謂對WB實驗的注釋,初入實驗室的“菜鳥”可以很快上手,做出漂亮的條帶,做過多年的“大神”也可能一著不慎,實驗“翻車”,結果一塌糊涂。有些實驗室甚至流傳著一些所謂的“玄學”,新手人品好,難做的條帶給新手做等等。真的是這樣么?實驗技術可不是拼人品,靠運氣的事兒,接下來小編將會為大家帶來WB進階技巧系列,干貨滿滿,讓大家提升W...
蛋白質印跡(WB)用于測量不同條件下特定蛋白的變化。在蛋白質印跡(WB)過程中涉及許多步驟,包括樣品制備、電泳、蛋白轉移、抗體孵育和信號檢測。為了解釋蛋白質印跡實驗的結果,一個貫穿全過程的內參是必須的。內參可保證每個泳道中加入了相同量的蛋白樣品,不同泳道上的蛋白以相同的效率從凝膠轉到膜上,不同泳道上抗體孵育(對于一抗而言,必要的話也包括二抗)、信號檢測都是一致的。內參的信號通常用來對目標蛋白的信號進行標準化。需要強調的是,對照蛋白抗體應該與實驗抗體在相同的印跡上進行。不同的樣...
血清是由血漿去除纖維蛋白原而形成的一種很復雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養條件不同而異。血清是血漿中不含纖維蛋白原的膠狀液體,具有維持血液的正常粘度、酸堿度、滲透壓等作用。它主要由水和各種化學成分組成,這些化學成分包括白蛋白、α1、α2、β、γ-球蛋白,甘油三酯,總膽固醇,谷丙轉氨酶等。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機物等,這些物質對促進細胞生長或抑制生長活性...
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