各位老師們培養細胞時想必頭疼的就是各種污染問題,尤其是一些珍貴細胞,發現污染后更是欲哭無淚,有時候出現污染但是沒有留心則會影響整個實驗進度,所以小愛為大家掙了一下細胞培養出現的問題和處理方法,爭取讓老師們少走些彎路。一、黑膠蟲污染因為小愛近期收到客戶反饋實驗細胞被黑膠蟲污染導致實驗無法進行,所以這邊首先解一下黑膠蟲污染,黑膠蟲屬于一種爭議生物,有人認為是從血清中來的一種原蟲,也有人認為是細菌,或是真菌,也有人認為是血清中的蛋白的結晶。"黑膠蟲"可寄生于動物細胞,也可以生存于中...
細胞在體外能夠成功生長,培養基的選擇及培養方法的優化十分關鍵。細胞在單純的培養基中不能存活,各種類型的細胞培養中必須提供某些生長因子、黏附和伸展因子、微量元素等營養物質。傳統培養基中一般會添加動物血清如牛血清等。胎牛血清應取自剖腹產的胎牛;新牛血清取自出生24小時之內的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。其中胎牛血清是品質較高的,因為胎牛還未接觸外界,血清中所含的抗體、補體等對細胞有害的成分少。血清培養的優勢與局限采用天然來源的血清作為細胞培養添加物,優勢在于提供豐富...
生物學科作為實驗學科,嚴謹是很重要的品質,相信很多小伙伴經過長年實驗的熏陶,已經形成了一定程度的選擇困難。胎牛血清現在種類眾多,很多人都很難分辨出質量的好壞,這就讓人們購買有難度了。畢竟買到劣質的胎牛血清會很吃虧,這點必須注意。那么要怎樣分辨胎牛血清質量的好壞?拿到血清,先接觸的是血清外觀,對于缺少細胞培養經驗的人來說,外觀的判斷尤為重要1、顏色根據血紅蛋白含量的不同,胎牛血清可表現出黃色或紅色,我國的細胞培養用血清標準是不高于20mg/dl,實際上,血紅蛋白含量的高低對血清...
上一期我們為大家匯總了ELISA實驗原理、樣本準備和預實驗相關的十個常見問題及解答,可能有心急的小伙伴早就想要了解更多后續關于ELISA實驗方面的問題了,不要走開,接下來將給您帶來相關解答~Q:invivo實驗周期長,不太好做預實驗,對ELISA結果會有影響么?怎么辦?A:如果您實驗室之前建立的invivo實驗protocol經過驗證,可以保證有效性,那么,可以不用再進行相關的預實驗;并且,如果實驗周期較長,樣本獲取不易,同時又需要檢測較多指標,建議將樣品分裝凍存,避免反復凍...
脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)是所有革蘭陰性細菌外膜的主要組成部分,維持了細菌的結構完整性,并保護細菌膜免受某些化學物質的攻擊。LPS被稱為內毒素,是革蘭陰性菌主要致病成分,可引起強烈免疫反應,導致幾乎所有的真核細胞發生形態、代謝和基因表達變化,刺激宿主細胞因子失控性表達,發生嚴重感染。敗血癥就是由LPS引發的重要疾病之一,敗血癥發作時,患者體內LPS濃度將極大提高,以至于身體出現災難性的炎癥反應。大量實驗證實,LPS、LPS結合蛋白(lipopo-l...
植物血凝素(Phytohaemagglutinin,PHA)是一種發現于植物特別是豆科植物中的凝集素(lectin),屬于高分子糖蛋白類,是低聚糖(由半乳糖,N-乙酰葡糖胺和甘露糖所構成)和蛋白質的復合物,具有促進外周血淋巴細胞(PBMC)有絲分裂和誘導干擾素分泌的活性。在生命科學領域,植物血凝素被應用為一種促細胞分裂原(mitogen),在體外能刺激小淋細胞轉化成具有免疫活性的淋細胞,并促進其分裂。轉化的淋巴細胞能分泌各種淋巴因子。主要應用如下:1、PHA對外周周血淋巴細胞...
白細胞介素4(interleutin-4,IL-4),屬于紅細胞生成素超家族成員,位于活化T細胞,在Th2亞群產生,此外,肥大細胞、IL2刺激小鼠T細胞系2.19、ConA刺激人Th克隆2F1、小鼠胸腺瘤EL-4細胞以及B細胞系CH2均能分泌IL-4,IL4分子量為140kDa,胞膜外區209氨基酸,跨膜區24氨基酸,胞漿區569氨基酸。IL可促使抗原活化的B細胞分裂增殖,但其作用較IL-2稍弱,而IL-4能促使靜止的B細胞表達MHCⅡ類分子、FcεRⅡ/CD23和CD40的...
二抗是在其它宿主體內制備的能與一抗或一抗片段結合的抗體,根據實驗需求,二抗上通常連有酶或熒光素等標簽。由于二抗所具備的優點使得其在免疫學實驗中得以廣泛應用,如WB/ELISA/IHC/IP等。二抗針對某一特定物種的所有抗體均具有特異性,因而使用特定標記的二抗可以免去對每一個一抗進行標記,大大節省了時間和費用;此外,一個一抗分子可以同時結合幾個二抗分子,從而使信號大大增強,提高了實驗靈敏度。二抗,廣義上是指專門和一抗進行特異性反應和結合的抗體。檢測任何目的靶蛋白都有不止一種抗體...
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