一、什么是生物發光法 ATP 微孔檢測技術？

ATP 微孔板檢測試劑盒依托螢火蟲熒光素酶生物發光反應實現 ATP 定量，區別于傳統比色法、ELISA 法 ATP 檢測：比色法依靠酶促顯色測 OD 值、靈敏度僅 μM 級；ELISA 依托抗原抗體結合，操作周期長；而本產品采用生物發光法，以熒光素酶催化 D - 熒光素、ATP 發生生化反應，光子釋放量與 ATP 濃度線性相關，靈敏度可達≤0.001 μM，線性區間 0.001~1 μM，發光信號可穩定維持 5~30 min，規避瞬時發光帶來的讀數誤差。

ATP生物發光反應原理：ATP + D-熒光素 + 熒光素酶+輔因子 → 氧化熒光素+光子；RLU發光強度與ATP摩爾濃度呈正比。

二、試劑盒可適配哪些生物樣本檢測？

該試劑盒適配細胞培養上清、細胞裂解液、動物組織裂解液三類主流生物樣本，不同樣本前處理方案差異化：懸浮細胞上清經 300 g 低溫離心收集；貼壁 / 沉淀細胞添加 0.1% Triton X-100-PBS 冰浴裂解；動植物組織使用 1% Triton X-100 緩沖液勻漿裂解，裂解后 10000 g 低溫離心取上清，暫存樣本可 -80℃凍存，檢測前用配套緩沖液梯度稀釋。

三類樣本前處理流程：
   細胞培養上清：4℃ 300g離心
   細胞裂解樣本：0.1%Triton冰浴裂解，10000g離心，獲取待測上清、-80℃備用

組織裂解樣本：1%Triton勻漿破碎，10000g離心，獲取待測上清、-80℃備用

三、哪些科研實驗優先選用該試劑盒？

1. 藥物高通量篩選實驗：抗腫瘤藥、小分子化合物細胞毒性篩選，通過 ATP 含量變化量化藥物對活細胞的殺傷效率；
   2. 細胞增殖與凋亡實驗：檢測干預后細胞內 ATP 波動，評價增殖速率與凋亡水平；
   3. 線粒體能量代謝研究：氧化應激、線粒體損傷模型中胞內 ATP 定量；
   4. 組織生理病理分析：病理造模動物臟器組織能量代謝檢測。

實驗以梯度 ATP 標準品（0.0039~1 μM）建立標準曲線，依據 RLU 數值換算樣品 ATP 濃度，試劑盒配套標準品（100 μM）便于梯度倍比稀釋，標曲 R2 可達 0.998 以上，定量準確度優異。ATP標準曲線適用于細胞毒性、代謝、藥物篩選數據換算。

四、試劑盒使用關鍵注意事項是什么？

試劑盒組分含檢測緩沖液、D - 熒光素、輔因子、熒光素酶與 ATP 標準品，試劑需全程冰上保存，-20℃避光儲存有效期 12 個月；工作液按樣本數量現配現用，空白孔、標品孔、樣品孔各加 50 μL 體系試劑，室溫孵育 5 min 后酶標儀讀數，每次實驗必須同步繪制標準曲線，產品僅限科研實驗，不可用于臨床診斷與藥品檢測。

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