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1.如何保存和分裝抗體？對(duì)于許多抗體而言，分裝為小等份在-20℃或-80℃下凍存是*的保存條件。抗體保存應(yīng)避免反復(fù)凍融，分裝可以zui大限度減少凍融對(duì)抗體造成的損壞，還可避免多次從同一管中移取抗體而引入污染。但是每份不應(yīng)該少于10uL。分裝的體積越小，抗體的濃度受蒸發(fā)和管壁吸附的影響就會(huì)越大。大部分情況下，抗體在4℃條件下能夠保存1-2周。但有部分特例。為了防止微生物污染，可在抗體中加入適當(dāng)濃度的NaN3。如果要用抗體對(duì)活細(xì)胞進(jìn)行染色或處理，或者要用抗體進(jìn)行體內(nèi)研究，則不能使...

BSA試劑重金屬(如Pb)：BSA試劑的基本信息，貨號(hào)：A8020規(guī)格：10g100g500g1000g別名：牛血清白蛋白(第五部分)；牛白朊(第五部分)；牛白蛋白；蛋白粉；BSAV；Albumin(bovinefractionV；BovinealbuminfractionⅤ;BovineserumalbuminfractionⅤ分子量：68Kd。外觀：類白色凍干粉。特性：純度（蛋白質(zhì)）：≥95%，水≤5%；均一化電泳檢測(cè)。雜質(zhì)：Na：BSA試劑可提高特異性的識(shí)別能力。在做w...

WB常用試劑使用可逆染色劑例如麗春紅S檢測(cè)轉(zhuǎn)膜效果，檢查轉(zhuǎn)膜操作是否正確。PVDF膜需預(yù)先浸在甲醇中，然后浸到轉(zhuǎn)移緩沖液中。代替5%脫脂奶粉，使用含0.5%脫脂奶粉或無脫脂奶粉的抗體稀釋液，或更換封閉劑，減少封閉時(shí)間。使用新鮮一抗，重復(fù)使用有效濃度會(huì)降低。在孵育和洗滌液中加入溫和去污劑如吐溫-20。脫脂奶粉含有酪蛋白，該蛋白本身就是一種磷酸化蛋白，會(huì)結(jié)合磷酸化特異性抗體而易產(chǎn)生高背景。使用BSA代替奶粉作為封閉劑。WB常用試劑使用溫和的去污劑如吐溫-20，或更換封閉劑（常用的...

封閉的原理：固相載體表面(如elisa板，NC膜或者PVDF膜上等)有很多孔洞，通過電轉(zhuǎn)或包被，膠上的蛋白被轉(zhuǎn)移到了膜上，或抗原/抗體固定在板上，蛋白以機(jī)械填補(bǔ)(堆積)和吸附的方式結(jié)合于表面。蛋白塞進(jìn)了表面的很多孔洞里面，但蛋白并不是連續(xù)的，有很多空隙，而且比如說樣品孔之間也有空隙，這些孔洞并沒有填進(jìn)東西，而抗體也是蛋白，也會(huì)被吸附在空的洞里，這樣就會(huì)有很多非特異性的信號(hào)。封閉液中的蛋白可以與表面上的空白空洞位置結(jié)合，同樣以機(jī)械填補(bǔ)(堆積)和吸附覆蓋的方式結(jié)合在膜上，因?yàn)橛小?..

預(yù)染marker通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加3000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入6000個(gè)細(xì)胞。具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定。37℃5%CO2繼續(xù)培養(yǎng)或按照實(shí)驗(yàn)具體需要進(jìn)行培養(yǎng)，一般培養(yǎng)6～24h。按照實(shí)驗(yàn)具體要求，給予0～20ml干預(yù)藥物處理，37℃5%CO2繼續(xù)培養(yǎng)至合適時(shí)間。預(yù)染marker分子量范圍–10種蛋白分子量范圍在10到170kDa之間。易于使用–與上樣緩沖液預(yù)先混合，可直接凝膠上樣，無需煮沸。條帶清晰–亮度類似，但顏色不同的...

蛋白酶k廣泛應(yīng)用在皮革、毛皮、絲綢、醫(yī)藥、食品、釀造等方面。皮革工業(yè)的脫毛和軟化已大量利用蛋白酶，既節(jié)省時(shí)間，又改善勞動(dòng)衛(wèi)生條件。蛋白酶還可用于蠶絲脫膠、肉類嫩化、酒類澄清。臨床上可作藥用，如用胃蛋白酶治療消化不良，用酸性蛋白酶治療支氣管炎，用彈性蛋白酶治療脈管炎以及用胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶對(duì)外科化膿性創(chuàng)口的凈化及胸腔間漿膜粘連的治療。加酶洗衣粉是洗滌劑中的新產(chǎn)品，含堿性蛋白酶，能去除衣物上的血漬和蛋白污物，但使用時(shí)注意不要接觸皮膚，以免損傷皮膚表面的蛋白質(zhì)，引起皮疹、濕疹等...

胎牛血清血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物，其組成成份雖大部分已知，但還有一部分尚不清楚，且血清組成及含量常隨供血?jiǎng)游锏男詣e、年齡、生理?xiàng)l件和營養(yǎng)條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長(zhǎng)因子、激素、無機(jī)物等，這些物質(zhì)對(duì)促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)或抑制生長(zhǎng)活性是達(dá)到生理平衡的。胎牛血清應(yīng)取自剖腹產(chǎn)的胎牛;新牛血清取自出生24小時(shí)之內(nèi)的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。胎牛血清是品質(zhì)zui高的，因?yàn)樘ヅ＿€未接觸外界，血清中所含的抗體、補(bǔ)體等對(duì)...

CRISPR/Cas9是細(xì)菌和古細(xì)菌在長(zhǎng)期演化過程中形成的一種適應(yīng)性免疫防御，可用來對(duì)抗入侵的病毒及外源DNA。CRISPR/Cas9系統(tǒng)通過將入侵噬菌體和質(zhì)粒DNA的片段整合到CRISPR中，并利用相應(yīng)的CRISPRRNAs（crRNAs）來指導(dǎo)同源序列的降解，從而提供免疫性。【CRISPR/Cas9研究史】來自美國伊利諾伊大學(xué)厄巴納-香檳分校的微生物學(xué)教授BillMetcalf和博士后研究員DiptiNayak記錄了在古生菌（Archaea，也譯作古細(xì)菌，或古菌）中使用C...